细胞增殖和活力测定

细胞增殖是细胞生长和分裂的过程，目的是补充已经死亡的细胞或扩大数量。虽然这一过程在健康组织中受到严格控制，但癌症的一个标志是细胞周期失调，导致细胞生长不平衡。准确测量细胞增殖试验的能力是癌症研究和药物发现研究的关键工具。的BioTek狮心王外汇自动活细胞成像仪和2022年世界杯抽签 细胞成像仪多模式阅读器支持多种方法进行细胞增殖和活力的测定，直接确定一个群体内的细胞数量。

高对比细胞计数-无标签直接细胞计数

无标签直接细胞计数技术是一种方便和有效的替代方法，依赖荧光标签或间接生化读出细胞群大小。高对比度(HC)细胞计数应用，可与BioTek狮心王外汇自动活细胞成像仪和Cytation细胞成像仪多模式阅读器，使用改进的高对比度亮场进行准确的无标签细胞计数。

图1．高对比度(HC)细胞计数使用改进的高对比度亮场成像，生成对应于每个细胞的独特明亮信号，使用Gen5图像分析工具很容易识别和计数。HC细胞计数与使用荧光核标签在细胞密度范围内获得的计数相当(HT1080数据所示)

高对比度细胞计数的主要优点

• 方便。直接细胞计数的准确性和灵敏度，而不受荧光标记的限制
• 健壮。自动图像分析产生的结果可与核染色在大范围的细胞密度
• 有见地。能够对细胞形态和活力进行详细的表型表征

使用直接细胞计数和%汇合率测定种群大小

图2。使用高对比度亮场图像和Gen5图像分析工具来量化细胞群的大小。在96孔微板中植入HT-1080细胞，使用高对比度亮场模式和4倍物镜成像。每个细胞群的相对大小被确定，并报告为成像区域内的汇合%和细胞计数。

动力学增殖和活力测定

一种结合无标签HC细胞计数和凋亡和坏死标记的荧光成像的全自动高通量检测，以监测细胞总数和细胞死亡随时间的变化。BioTek Lionheart FX自动活细胞成像仪和BioSpa活细胞分析系统支持多日增殖和活性应用。

图3．增殖的自动动力学分析。(A)细胞增殖384孔板概述。红色曲线表示在3天实验期间绘制的细胞计数。随着药物浓度从C排到P排的增加，在整个384孔板上观察到所有药物的增殖减少。(B)将3天内几种浓度的诺可达唑(橙色圈，n=12个重复孔)和喜树碱(绿色圈，n=12个重复孔)的平均细胞计数图叠加，使用Gen5™生成每种药物治疗的剂量-反应曲线。

细胞凋亡和坏死归一化到细胞总数的定量分析

结合无标记细胞计数和凋亡和坏死标记的荧光成像，提供了一种精确的方法来测量治疗诱导的细胞死亡随时间归一化的细胞总数。

图4．基于荧光的细胞动力学死亡分析。(A) pSIVA凋亡标志物和PI坏死标志物两次阳性的细胞示例图像。阳性的凋亡细胞和坏死细胞通过大小和信号阈值参数进行识别，并应用初级掩膜(图中为清晰显示放大区域)。(B) %凋亡和%坏死的动力学曲线用于生成剂量-反应曲线和EC₅₀值。

提高检测吞吐量和性能

BioSpa™兼容检测:在多达8个微板上进行活细胞分析

的BioSpa活细胞分析系统
能够对细胞增殖和死亡进行多平板动力学分析

应用笔记:

• 384孔格式细胞增殖的自动动力学成像分析
• 基于图像，无标签的方法检测和量化一般和定向T细胞激活
• 使用无标记细胞计数的动力学增殖试验

技术说明:

• 高对比度Brightfield

仅供研究用途。不用于诊断程序。

RA44274.5890856481