荧光极化

荧光极化(FP)测量是使用包括光路中偏振滤波器的光学系统进行的。使用偏振光激发微板中的样品。根据在井中发现的荧光分子的迁移率,发射的光将是极化的。例如,溶液中的大分子(例如蛋白质),由于其尺寸而相对较慢旋转,并在用偏振光激发时会发出偏振光。较小分子的快速旋转将导致信号的去极化。发射系统使用偏振滤波器来分析发射光的极性。低水平的极化表明小荧光分子在样品中自由移动。高水平的极化表明荧光分子附着在较大的分子复合物上。基于FP的测定的示例包括分子结合测定,从而可以检测出小的荧光分子结合(或不)与较大的非荧光分子。这种结合导致荧光分子的旋转速度较慢,并产生信号极化的增加。

分子用光激发。未结合的小分子发出去极化的光。

图1.分子用光激发。未结合的小分子发出去极化的光。

与大分子结合的小分子发出偏振光。

图2.与大分子结合的小分子发出偏振光。

FP在研究实验室中广泛用于研究分子结合或解离事件以及筛查实验室,以筛选候选药物。有许多FP分析套件可用于多种应用。

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