生物比较台提示- 3D细胞培养

在这里，我们将描述如何创建一个自定义协议，结合优化的参数，以获得特定分析工作流程的最佳性能。

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在过去的十年中，在临床试验中提高药物疗效的一个中心重点是增加在药物发现过程早期进行的测定的生物学相关性。然而，模拟一种药物仍然很困难在活的有机体内在响应中使用在体外化验。

今天我们将重点介绍3D细胞培养的重要性以及它对推进药物发现研究的影响。

在体外分析通常使用生长在二维硬塑料或玻璃基底上的细胞，这并不代表真实情况在活的有机体内细胞环境。在组织中，细胞与邻近细胞和细胞外基质(ECM)相互作用形成一个通讯网络，影响许多细胞过程，包括增殖、迁移和凋亡。

在一个简化的在体外在二维环境中，大多数组织特异性的结构和细胞间的通信信号都丢失了，因此需要先进的培养方法来更好地模拟活组织中的细胞功能。

三维细胞培养方法提供了一个基质，鼓励细胞组织成类似细胞的结构在活的有机体内环境，从而发展正常的细胞与细胞和细胞ECM相互作用在体外环境。

研究人员有什么选择来帮助3D培养细胞的形成?一种是聚合硬支架，通常由聚苯乙烯等交联塑料组成。第二，有生物支架，细胞与细胞外基质蛋白质结合，然后悬浮在细胞外基质蛋白质的基质中，通常在体内发现，为细胞提供结构和支持，第三，球体模型也很受欢迎，因为它可以模拟组织和肿瘤，这取决于所包含的细胞类型，预先制作的球体或微组织可以在微量滴度板中提供给你，以简化甚至消除细胞培养过程。

如果成本对你来说是一个障碍，或者你想对培养过程有更多的控制，还有两个选择来创建你自己的球体模型。首先是悬挂式滴液，细胞悬浮在30 - 50微升的滴液中，滴液悬挂在井底以下。随着时间的推移，细胞会在滴液中聚集。另一种流行的方法是使用涂有超低附着或ULA表面的微板。这些盘子的外观和行为很像其他圆形底板。然而，当添加细胞时，ULA涂层可以防止细胞附着在井底，从而促进细胞聚集在一起形成球体结构，并且由于球体已经在微型板井的底部，添加3D覆盖层，如软螺旋钻或Matrigel Matrix很容易完成。

一旦选择了培养格式，就需要考虑如何收集能够回答您的问题的信息。你是想监测细胞对实验性治疗的反应还是专注于了解细胞形态的详细变化。也可能是两者的结合。这里有两种方法可以用来收集单元格的信息。它们提供不同的结果，所以这实际上取决于你想要达到的细节水平和回答你的问题。微孔板阅读器通常采用基于PMT的检测器，提供了一种快速的方法进行霍维尔测量。在3D培养细胞上进行的实验和通常在微板阅读器上进行的实验包括细胞毒性和信号转导分析。另一方面，显微镜和细胞成像仪通过使用广角显微镜，通过使用适当的物镜进行放大，增加了从每次实验中获得的信息量。不需要的井眼区域被排除在检查之外，增加了所查看图像的细节和生成的数据。

高含量成像仪提供了最大数量和呼吸基于成像的数据。成像过程的自动化，加上高含量分析软件，可以以高通量的方式进行图像采集和分析。如果您需要结合多种功能来获得结果，可以选择将显微镜与多模态微孔板阅读结合起来，可以提供表型和定量结果。从一个珍贵的样本中，我们可以快速而容易地获取多条信息。根据您的研究需求，多功能仪器可能是您正确的选择。

3D细胞培养是一个令人兴奋和重要的实验工具，它使研究人员能够更好地模拟活体组织在体外环境。在3D培养方法和收集数据所需的详细程度方面，您有许多选择，而在可用的选择中导航可能很困难。一旦你做出选择，你从使用这种技术中得到的结果将是真正无价的。