如何使用BioTek的细胞计数和活力应用程序

脚本:

大家好，欢迎来到BioTek细胞计数和活力应用程序．这个应用程序的目的是自动血细胞计基于计数悬浮哺乳动物细胞使用BioTek成像。细胞计数和活力应用程序需要使用相位对比成像。在使用该应用程序之前，确保您的仪器已打开并配置了4倍相位对比度物镜。如果您需要帮助确定您的仪器是否配置正确，请联系BioTek的技术援助中心．

当细胞计数和活力应用程序启动时，将生成一个新的空白模板。要导航到以前生成的数据或导入以前的设置，请单击左上角的菜单图标。否则，使用左边的菜单来计数新批次的单元格。

首先，点击这里选择您将使用的计数幻灯片类型。该应用程序兼容一次性或可重复使用的计数幻灯片。重要的是要记住，计数幻灯片必须装入正确的BioTek支架。将鼠标悬停在幻灯片选项上以再次检查工具提示中列出的数字与刻在支架上的数字是否匹配。

在本教程中，我们将选择一次性选项。因为每个一次性计数载玻片有两个样品室和最多四个载玻片装入载玻片支架，你可以同时运行多达8个样品。接下来，如果您的样品使用台盼蓝，请确保启用可行性检测选项。当设置为时，应用程序检测并自动计算样本中存活细胞和非存活细胞的百分比。因为假设细胞混合物是1比1稀释到台潘蓝，打开活力检测也会将稀释因子设置为这里显示的2倍。将稀释因子应用于结果，以便稍后显示的细胞浓度将反映稀释前的浓度和台帆蓝。如果您在装入计数载玻片之前进一步稀释样品，可以输入自定义稀释因子。如果一开始忘记输入自定义值，可以在图像捕获后随时修改。

最后，选择包含样品的计数室的相应位置。点击每个房间的位置来激活。如果您想为每个示例提供惟一的名称，请在激活的文本框中输入它们。

如果一切正常，检查幻灯片适配器是否正确加载到仪器中，然后单击开始。

现在图像捕获完成了。让我们回顾一下结果。每个样品的图像和计算出的细胞浓度都显示出来。因为活力检测是打开的，所以每个样本的活细胞和死细胞的浓度以及它们的百分比都会被报告出来。记住，这些结果说明了这里所示的稀释因子，如果需要可以修改。

只有两个计数幻灯片的结果可以同时查看。点击这里查看其他幻灯片的结果。你可以使用鼠标滚轮放大或缩小任何图像。使用屏幕顶部的这些按钮将所有图像返回到相同的缩放级别。此外，您可以双击任何图像以全屏查看它。再次双击返回到侧边视图。

默认的分析设置通常可以很好地准确识别样本中的活细胞和死细胞。然而，有些样品可能需要对分析参数进行微调以提高计数精度。如果需要调整，单击调整分析/图像选项卡来访问这些设置。为了辅助这一过程，放大一张图像会很有帮助。对活细胞和死细胞进行独立分析。通过分析发现的活细胞用绿色表示，而死细胞用红色表示。点击这里在高亮选项之间切换。对于活细胞和死细胞分析，您可以设置阈值和要包括的细胞大小范围。死细胞分析还允许您对台盼蓝阳性细胞的圆度或圆度设置限制。

有关使用这些设置的快速提示，请将鼠标悬停在它们的每个标签上。每当你调整一个设置。单击预览按钮以测试您的更改如何影响确定的销售。单击Apply to All锁定设置并将其应用于所有示例，或单击Cancel恢复到以前的设置。一旦使用修改后的设置完成分析，每个样本的重新计算结果将显示出来。

要将所有样本中的数据导出到电子表格中，请单击屏幕左下方的导出按钮，然后选择文件夹位置。此外，您可以使用图像导出菜单来导出图像。默认情况下，选择所有图像。单击各个腔室以取消选择并从导出中排除它们。

的细胞计数和活力应用程序还包括一个方便的工具，以协助细胞在所需浓度的下游播种。点击稀释计算器选项卡，输入您想要的细胞浓度和最终体积的值。如果您愿意，可以通过在下拉菜单中选择最终单元格号，而不是使用浓度。输入所需值后，单击这里运行计算器。对于每个样品，计算器提供了细胞悬浮液和混合新鲜介质的体积。如果您想修改每个样品的期望浓度或最终体积，您可以在任何样品框中更改这些值。单击Export按钮可将所有稀释计算器结果导出到文本文件中以供打印。
感谢您观看细胞计数和活力应用程序的介绍。如果您对这款应用程序或任何其他BioTek产品有任何问题，请使用列出的信息联系我们的技术支持中心。