2022年4月20日
主持人:Gregg Fields博士，佛罗里达大西洋大学执行董事，I-HEALTH教授，Ania Knapinska博士，alphhazyme研发总监，Brad Larson，安捷伦公关产品经理
恶性胶质瘤，包括多形性胶质母细胞瘤(GBM)和星形细胞瘤，是美国最常见的原发性脑肿瘤。膜1型基质金属蛋白酶(MT1-MMP)在肿瘤的进展、侵袭、迁移和血管生成中起着至关重要的作用。
多年来，研究肿瘤侵袭的最简单模型是在二维(2D)单层中培养细胞。尽管该模型很简单，但仍有许多局限性，例如单层细胞与三维(3D)方式培养的细胞表现不同。更新、更先进的细胞模型已经开发出来，以更好地模拟体内细胞环境和入侵，特别是将3D肿瘤模型嵌入水凝胶中，以允许入侵ECM。这种类型的模型允许更复杂的发展，更紧密地模拟肿瘤的发展，并导致基质降解酶的增加，如基质金属蛋白酶。虽然结合3D细胞模型已被证明可以提供更能反映体内反应的结果，但这可能会导致增加细胞成像时间和存储容量需求。这是因为需要在x、y和z平面上捕获多个图像，以准确地可视化入侵。
在本次网络研讨会上，我们描述了一种“命中挑选”方法，将来自测试井的基于ppmt的荧光信号与来自未处理的阳性对照井的荧光信号进行比较，以触发“命中”测试井的细胞成像。一种亲荧光FAM-fTHP-9底物被MT1-MMP优先靶向和降解，开发用于此目的。MT1-MMP活性导致底物裂解，并通过Agilent BioTek Cytation 5细胞成像多模式阅读器的平板读取能力检测到荧光信号的增加。2022世界杯附加赛决赛只有含有MT1-MMP抑制剂的测试井，与未受抑制的对照井相比，产生统计上较低的荧光信号，然后触发成像。结果是一种易于执行，健壮的方法，以减少图像捕获时间和存储需求。