6月14日
长期生长测量通常要求培养保持在最佳或期望的生长条件下，并定期进行测试，因为微孔板阅读器可能不适合最佳生长。例如，藻类培养通常需要多色光来进行光合作用生长，而微孔板阅读器的读取室通常是黑暗和光线紧张的。此外，细胞培养要求湿度水平接近100%，以防止蒸发损失。此外，长期生长监测通常只需要每天一次或两次测量，持续数周。在排除所有其他实验的情况下，专门为这样一段时间的微皿阅读器是不实际的。预算限制决定了提供第二个专用阅读器的成本是令人望而却步的。传统的解决方案是在实验结束时读取样本作为传统的端点读取并手动整理数据。的使用不连续动力学选项在Gen5数据分析和读写器控制软件为这一问题提供了解决方案。
不连续动力学提供了一种长期动力学读数的方法，在任何一段时间内对一个板或一系列板进行多次测量，而不束缚阅读器。该选项允许在每次读取间隔后移除板进行处理，因此可以在读取间隔之间使用阅读器进行其他实验。启用时，不连续动力学选项使用PC的内部时钟为每个读取事件提供时间和日期戳，允许Gen5跟踪整个试验的总运行时间。
选择不连续动力学
为了使用不连续动力学选项，需要创建一个新的实验文件，要么直接启用该功能，要么使用已存在的启用该功能的Gen5协议文件。在运行测试之前启用这个选项是至关重要的。不连续动力学从高级选项控件中的按钮或选项链接协议的程序窗口。
图1所示。高级选项窗口
在Advanced Options窗口中有一个复选框，用于启用不连续动力学(图1红色箭头)。一旦启动不连续动力学，Gen5™要求输入“估计”总运行时间天数:小时:分钟以及预期读取间隔。请注意，这些只是一个估计，不会影响实际的实验活动。Gen5使用您估计的时间线设置数据视图选项和占位符公式，直到捕获实际数据。当对所需的时间段和间隔有疑问时，最好高估它们，以便读取值的数量最大化。请注意，“程序完成时弹出板”选项已启用。此选项(当读者支持时)使您对印版加工有更多的控制。默认设置反映了大多数BioTek读取器:当读取/过程完成时，它会弹出板。如果需要在读取完成后将板保留在读取器内，则可以取消选择在程序结束时将板保留在读取器内的选项。
例子
小球藻寻常的可以以藻类生长为例来说明不连续动力学过程。如图2所示，使用光散射吸光度作为细胞生长的指标，对该单细胞藻类菌株的生长进行了为期17天的监测。随着时间的推移，在600 nm处测量的吸光度增加，表明细胞数量增加。请注意，虽然每天都进行一次测量，但数据点并不是均匀间隔的，这表明板测量不一定在每天的同一时间进行，或者遗漏了一个测量点。
图2。的第5代动力学图小球藻寻常的藻类的生长。第5代不连续动力学程序用于维持数据时间轴。平均斜率值(绿线)由数据点3-11确定。
讨论
不连续动力学的目的是以类似于传统动力学测量的方式将一系列端点测量联系在一起，并提供相同的数据缩减工具。不连续动力学有几个明显不同于传统动力学的特征。如前所述，不连续动力学允许用户在很长一段时间内进行动力学测量，而不会在读取之间的间隔期间捆绑读取器。此外，它还允许读取间隔的灵活性。因为平板读取是手动启动的，读取之间的时间不是严格固定的。根据读取板时的总运行时间绘制数据。所有的动力学计算都是记录时间的函数。这使得Gen5™可以自动确定平均斜率V或最大斜率V等计算，而无需考虑实际测量间隔。不连续动力学过程也可以用来监测几个板块随着时间的推移。这是特别有利的BioTek阅读器使用结合BioStack™微型板块堆垛机。在无需人工干预的情况下，可以在任意次数的循环中依次读取多个板，由Gen5数据分析软件自动生成每个板的每口井的动力学曲线。
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