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微孔板和微体积中核酸的分光光度法定量

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2014年6月27日

为什么要量化核酸?

核酸是所有生物生命的基石,从植物、动物到细菌和病毒。在研究中,重要的是在测序、限制性内切酶消化和连接、PCR和qPCR以及许多其他应用等下游过程之前量化RNA和DNA。在确定核酸浓度的同时,在将样品用于下游应用之前,计算核酸与蛋白质的比值以确定纯度也很重要。

核酸定量方法有荧光法和分光光度法。前者用于需要微量核酸的高灵敏度应用;后者更常规地用于普通的核酸提取程序。在本应用指南中,我们将详细讨论在微孔板仪器和专门的微体积附件中执行的分光光度法。

本申请指引涵盖:

  • 吸光度量化方法
  • 比色皿和其他样品容器类型
  • 路径长度校正和核酸定量
  • 核酸纯度评估
  • 最佳实践

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