细胞周期分析

细胞周期进程是一个严格调控的过程，包括细胞核DNA内容在细胞分裂之前的复制。调节这一过程的控制机制在肿瘤细胞中经常被破坏，并成为治疗性化合物在癌症治疗中的可行靶点。自动化成像和分析技术能够在微板格式中详细描述细胞周期进程和有丝分裂指数的测定。

图1所示。细胞周期和有丝分裂的阶段

利用核染色和自动成像来确定细胞周期不同阶段的细胞群百分比

基于群体的细胞周期分析使用可量化的荧光DNA染色是一种行之有效的方法，以区分细胞周期的不同阶段。自动成像和分析协议使用安捷伦BioTek2022世界杯附加赛决赛狮心王自动显微镜或安捷伦BioTek2022世界杯附加赛决赛Cytation细胞成像多模式阅读器为进行细胞周期分析提供了一种方便、可靠的方法。

• 染色细胞的荧光强度与它们所含DNA的数量有关。
• 像Hoechst 33342这样的核染色是DNA特异性的，为基于成像的细胞周期分析方法提供了一种有效的选择。
• 低倍率成像(4倍物镜)和宽视场相机为分析提供了大的代表性样本量。
• 兼容动态活单元格格式。

图2。(A)细胞周期与DNA含量直方图的关系。随着细胞在细胞周期中的进展，它们的DNA含量在有丝分裂之前翻倍。(B)用核染色Hoechst 33342处理的细胞显示与DNA含量成正比的荧光，使用Gen5图像分析工具和总物体荧光度量进行量化。

图3。Mevinolin和Nocodazole处理PC-3细胞的核染色直方图分析。(A)美维诺林和(B)诺可达唑治疗作为对照来定义G1 (RED)和G2 (BLUE)亚群。s期(GREEN)定义为G1 - G2之间的区域。

用低磁成像和有丝分裂标记物测定有丝分裂指数

有丝分裂指数是指细胞在任何时候发生有丝分裂的百分比，是异步测定细胞周期长度最常用的标记物。

图4。用核标记(Hoechst 33342)和有丝分裂标记(抗磷组蛋白H3抗体)对细胞群进行4倍放大成像。(A) Gen5分析识别有丝分裂细胞(黄色掩膜)相对于总细胞计数，以报告有丝分裂指数，可用于(B)量化剂量反应。

使用Gen5 AutoROI模块和高分辨率成像对有丝分裂的详细描述

安捷伦的2022世界杯附加赛决赛BioTekGen5AutoROI模块使用户能够自动识别感兴趣的区域(roi)，包括在种群中潜水的细胞。首先，低倍率扫描使用有丝分裂标记自动检测和识别有丝分裂细胞，然后对感兴趣的有丝分裂细胞进行自动高倍率成像。

图5．Gen5 Image+和Gen5 Image Prime的AutoROI模块是一个工具集，使用户能够自动识别感兴趣的区域(roi)。低倍率扫描使用有丝分裂的荧光标记物(抗磷组蛋白H3抗体)自动识别有丝分裂细胞。每个感兴趣的有丝分裂细胞然后自动扫描在所需的更高倍率详细描述。

图6．RPE1细胞在有丝分裂不同阶段的免疫荧光图像。固定RPE1细胞的肌动蛋白(绿色)，微管蛋白(红色)和DNA(蓝色)染色。共焦图像表示(A)前期;(B)后期;(C)中期;(D)有丝分裂的末期。

提高检测吞吐量和性能

应用程序公告:

• 使用细胞群分析和自动ROI定义共聚焦成像对有丝分裂的详细描述

申请注意事项:

• 监测癌细胞的细胞周期进展

视觉简介:

• 使用细胞群分析和自动ROI定义共聚焦成像对有丝分裂的详细描述

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