3D细胞培养测定法

三维(3D)细胞培养模型已经建立得很好在体外与二维细胞培养系统相比，这是一种更具有生理相关性的细胞间相互作用的癌症研究的实验方法。透明U底超低附着(ULA)微板的使用促进了球形细胞的形成和生长，已成为用于量化球形细胞增殖和活力等应用的标准3D细胞培养系统。

无标签球体增殖试验

Brightfield成像为量化球体尺寸提供了一种方便的无标签方法。除了简单的端点评估，机载环境控制内BioSpa活细胞分析系统能够对球状体增殖进行详细的长期动力学分析。

视频1。无标签成像和Gen5图像分析工具自动识别球体和报告大小，以量化和比较处理条件。HT-1080细胞被植入96孔的ULA微孔板(1000细胞/孔)中，培养48小时以形成球形。使用BioSpa细胞分析系统，每24小时使用4倍物镜获取亮场图像，监测球体增生。Gen5对象掩码(黄色)放置在每个球体周围进行分析，实时报告对象和面积。

高密度微板格式用于评估多重处理条件的重复

图1所示。球形增殖试验兼容96孔和384孔的ULA微板，用于更高的通量应用。(A) 96井格式的每口井球面面积动力学剖面矩阵视图。(B)每种药物浓度的球面面积随时间的平均分布，显示误差条(SD)，用于不同治疗之间的比较。

基于荧光的三维细胞模型增殖和活力测定

荧光标记和表达标记能够详细评估球体的大小和细胞活力。荧光成像协议Cytation成像阅读器和狮心王外汇自动显微镜和Gen5图像分析工具可以使用面积和荧光强度指标定量分析球体的大小和活力。此外,2022世界杯32强赛程表时间 共聚焦成像阅读器可以直接计数球体样品中的标记细胞，以确定相对细胞数量和凋亡或坏死细胞的百分比。

图2．三维细胞模型增殖和活力测定。(A)结合成像兼容的ULA微板(促进均匀球形形成)和广泛的可用荧光细胞活性标记的分析工作流程示意图。(B)使用Cytation C10和Gen5图像分析工具获取单个光学切片或z-堆栈，可以对球体进行详细的定量分析。

直接细胞计数在球形评估治疗反应

图3。直接细胞计数提供了药物治疗反应的定量读数。(A)使用Gen5图像分析工具(分别为黄色和紫红色掩膜)确定细胞的相对总数和(B)凋亡或坏死细胞的相对数量。使用(C)相对总细胞数或(D)坏死标记阳性细胞与总细胞数的比值生成剂量响应曲线。

提高检测吞吐量和性能

3D细胞培养的自动温和培养基交换

的BioTekMultiFlo外汇与自动媒体交换(AMX)模块
自动介质交换和清洗球体，肿瘤和其他3D细胞结构
帮助保护3D细胞培养模型，促进细胞结构生长

应用笔记:

• 使用3D PrimeSurface®超低附着微板进行亮场和荧光成像
• 使用新颖的MultiFlo FX附件进行球形培养的自动媒体交换

视觉简介:

• 用于精确测定细胞数量和评估治疗效果的球形共聚焦成像

仅供研究用途。不用于诊断程序。

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