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从错综复杂的染色体世界中梳理出细节

佛蒙特大学分子生理学和生物物理系Stumpff实验室

5-April-19

杰森Stumpff正常的人类细胞包含23对染色体,每对染色体都编码生命的遗传信息,并从父母那里传递可遗传的特征。染色体紧密折叠成折纸一样的结构,其复杂性令人难以置信,但在细胞分裂或有丝分裂过程中,它们优雅地展开和重新折叠。有丝分裂过程中的微小错误会导致含有异常数量染色体的非整倍体细胞的形成,并导致流产和健康障碍,如唐氏综合症。此外,这些错误与肿瘤发生和加速肿瘤生长速率有关。

在佛蒙特大学分子生理学和生物物理系,Jason Stumpff博士的实验室对微管动力学和细胞分裂特别感兴趣,以及如何利用这些机制来维护正常功能细胞的基因组完整性,或者相反,破坏或摧毁功能异常的肿瘤细胞。最近,Stumpff实验室正在仔细研究一种用于细胞分裂的特殊分子,它被用作抑制三阴性乳腺癌的靶标。这种特别罕见且具有侵袭性的癌症缺乏雌激素、孕激素和HER-2受体,因此普通治疗无效。实验室中用于癌细胞和其他研究的分析包括细胞分裂过程中的活细胞成像和其他先进的显微镜技术,以可视化染色体之间的连接和分离它们的分子机制,以及该机制是如何被调节的。

设施中现有的手动成像系统在吞吐量方面受到限制,并且不够敏感,无法检测到细微的变化。当Stumpff博士与BioTek的应用科学家讨论他的实验意图和现有的成像限制时,他了解了BioTek的情况BioSpa™活细胞分析系统,包括2022世界杯南美区预选赛 细胞成像多模式阅读器和BioSpa 8自动化的孵化器。BioTek的成像专家与Stumpff实验室合作,设计了一种用于BioSpa系统的96孔式灵敏的动力学增殖测定方法。

在免提实验中,含有细胞的微板在BioSpa 8中使用最佳环境条件孵育,然后自动转移到Cytation 5中,在四天内每两小时进行高对比度亮场成像。Gen5软件自动计算细胞数量,并创建可复制的生长曲线,还可以创建每口井的延时电影。“BioSpa系统为实验室的研究能力增加了一个新的维度,并减少了手动分析图像以生成定量数据的耗时瓶颈,”Stumpff博士评论道。此外,他还提到了增强的吞吐量、各种成像模式、不同细胞治疗的并行成像、长期成像和内置分析工具,这些在他的研究过程中特别有益。

该实验室目前还与BioTek的应用小组合作,开发一种筛选crispr修饰细胞系的检测方法,并继续寻求通过使用BioSpa系统来加强研究的方法。斯坦普夫博士很快指出,不仅仅是BioTek的产品超出了预期。乐鱼平台入口对服务请求的快速响应最大限度地减少了任何潜在的系统停机时间,多个BioTek团队始终努力确保BioSpa系统对Stumpff实验室的特定研究问题和目标尽可能有用。他总结了他的经验,他说:“BioTek的应用程序和工程团队愿意与我们一起投入时间,帮助我们微调我们的分析,并以新的见解和工具响应我们的需求,这给我留下了深刻的印象。这是一个巨大的优势,我们很感激他们为我们付出了额外的努力。”

HCT验证单元数HCBF E7带边界的brightfield1
使用Cytation 5系统在高对比度亮场成像的结直肠癌细胞(灰度)
Gen5软件自动计数(黄色轮廓)。

要了解更多关于斯登普夫实验室在佛蒙特大学的分子生理学和生物物理系,请访问他们的网站


UVM

感谢Jason Stumpff博士分享他的BioTek经验。

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